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液相色谱(HPLC) 法测血清维生素C 含量.pdf
2008/12/23 [2914]

极易氧化, 这使其测定具有很大难度。据报道, 测定
维生素C 常用以氧化还原为基础的比色法或衍生
反应为基础的荧光法, 但这些方法操作复杂费时,
在样品处理过程中很容易使维生素C 损失, 且没
有高的灵敏度和度[ 1, 2 ]。为了寻找更好的维生
素C 测定方法, 使其更适用于社区或流行病学研
究, 笔者通过对色谱条件的优化, 建立了使用先进
的二极管阵列检测器(DAD) 的液相色谱(h igh
perfo rm ance liqu id ch rom atography, HPLC) 法。该
方法具有简便、快速、准确、灵敏的特点。
1 材料与方法
111 材料
11111 主要仪器: Beckm an 液相色谱系统:
Novean 色谱工作站, 168 型二极管阵列检测器
(DAD ) , ALL T IMA ODS# C18 柱5 L(250 mm ×
416 mm i. d) , 7752i 手动进样器;DL 2120 超声波清
洗器; GTL 216AL 高速台式低温离心机。
11112 试剂: 维生素C (S IGMA , Chem Co,U SA ,
色谱纯) ; 磷酸二氢钾、磷酸、甲醇、偏磷酸, 以上试
剂均为分析纯; 实验用水为去离子双蒸馏水。
112 方法
11211 色谱条件的优选: 根据对流动相的种类、浓
度及pH 值的优选, 本实验的*色谱条件为: 色
谱柱: ALL T IMA ODSC18 柱5 L( 250 mm × 416
mm i. d) ; 流动相: 100mmo l?L KH2PO 4, pH 3. 00,
检测波长: 243 nm ; 流速: 1 m l?m in; 进样量: 20Ll。
11212 样品预处理: 取011m l 血清, 加

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