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  • 细胞器的分离方法
    2009-5-18 6850
    实验室一般采用差速离心或密度梯度离心的方法得到分离细胞器。1.细胞膜的分离细胞膜又称质膜,分离细胞膜有助于研究生物膜的结构与功能。一般说,红细胞膜与线粒体膜的制备用差速离心法即可,其他细胞膜的分离可根据膜组分的密度大小不同,采用梯度离心后,分布于区域,可分离得到纯制品。2.线粒体的分离线粒体普遍存在于真核细胞中,它是细胞呼吸的主要场所,细胞活动所需能量主要依靠在线粒体内进行氧化所产生的能,线粒体的分离主要靠差速分离。3.线粒体膜分离线粒体膜分离方法主要是密度梯度离心。4.聚核...

  • 离心分离的应用
    2009-5-18 2100
    根据颗粒在作匀速圆周运动时受到一个外向离心力的原理,发展了一种离心分离技术。这项技术应用很广,诸如分离出化学反应后的沉淀物、天然的生物大分子、无机物、有机物,或者生物化学以及其他的生物学领域中常用来收集细胞、细胞器及大分子物质。在国内的蛋白质制药行业,离心的根本目的是浓缩和分离,将固体从液体中分离,或者将不同密度的悬浮物、液相通过沉降速度的差异分离开来。离心技术首先用于粗提收集菌体,其次是用于上柱前澄清,在药物分析中可以用来检定分子质量、纯度及筛选新的药物。

  • 离心机分离实例一
    2009-5-18 2101
    猪肾中微粒体膜组分粗品的分离仪器与试剂1.超速离心机(冷冻离心机)和转头2.匀浆缓冲液。50mmol/LHepes/NaOH(pH7.4),0.33mol/L蔗糖。3.重悬缓冲液。10mmol/LHepes/NaOH(pH7.4)。方法1.使用韦林搅拌器(要求4℃预冷)在10倍体积(1L)的匀浆缓冲液(要求4℃预冷),中破碎100g猪肾皮质。2.将匀浆物在离心机中于8000×g离心15min;3.小心地转移出上清液,并将其在26000×g离心2min;4.用重悬缓冲液(要求4...

  • 分析超速离心机测定溶液大分子的沉降速度
    2009-5-18 3365
    分析超速离心机能用于测定溶液中大分子的沉降速度,这就是通常所说的沉降速度法;或者在较低的离心转速下离心一定时间后,是其在离心分析池中各个平面位置的样品溶质浓度不再有变化,建立起平衡状态,从而测定其大分子的分布,即所谓的沉降平衡法。其他一些沉降速度法和近似沉降平衡法等都是在次原理上派生出的。在速度沉降试验中,离心机转速可用到60000r/min,甚至更高,依试样分子量大小而定。

  • 离心机历史发展与分类
    2009-5-18 2301
    中国古代,人们用绳索的一端系住陶罐,手握绳索的另一端,旋转甩动陶罐,产生离心力挤压出陶罐中浆果的汁液,这就是离心分离原理的早期应用。工业离心机诞生于欧洲,比如19世纪中叶,先后出现纺织品脱水用的三足式离心机,和制糖厂分离结晶砂糖用的上悬式离心机。这些zui早的离心机都是间歇操作和人工排渣的。由于卸渣机构的改进,20世纪30年代出现了连续操作的离心机,间歇操作离心机也因实现了自动控制而得到发展。1879年,瑞典的拉瓦尔发明*台从牛奶中分离奶油的分离机,它的转鼓仅是一个空心的圆筒...

  • 离心机梯度分离细胞时介质的选择
    2009-5-15 2486
    用离心机来分离细胞的梯度介质和密度梯度的制备受很多条件的制约,理想的梯度应满足以下条件:对细胞无毒;能形成具有足够密度的等渗介质;不渗入细胞;分级分离后容易从细胞中除去;形成梯度的粘度低。用来分类细胞的密度梯度形状各种各样,可以是连续梯度,也可以是不连续梯度,可以使用特殊梯度,如等动力梯度、等体积梯度、指数梯度和对数梯度。

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